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CONTEXTUALIZAÇÃO
A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é um dos avanços mais significativos da biologia molecular nas últimas décadas. A técnica de PCR consiste em realizar in vitro o processo de replicação de DNA, mecanismo de cópia de DNA em todas as células vivas. Atualmente, a PCR é utilizada em mais de 80% dos laboratórios clínicos ao redor do mundo e foi fundamental durante a pandemia de COVID-19. Mas o impacto da PCR vai muito além das pandemias. A técnica está na base de avanços cruciais em áreas como o diagnóstico precoce de câncer, o desenvolvimento de terapias genéticas e a medicina de precisão. Também, é uma ferramenta utilizada para a determinação de características genéticas individuais e em análises forenses.
Fontes: FREITAS, F. As aplicações da Reação em Cadeia da Polimerase na medicina humana. Disponível em: https://www.laborgene.com.br/as-aplicacoes-da-reacao-em-cadeia-da-polimerase-na-medicina-humana/. Laboratório Vicentino. Disponível em: https://labvicentino.com.br/2024/12/20/a-importancia-da-pcr-para-o-futuro-da-medicina/. Acesso em: 19 jan. 2026.
O QUE DEVE SER FEITO NESTA ATIVIDADE?
Um laboratório de análises clínicas e genética molecular recebeu duas demandas simultâneas, sendo:
1. Análise forense: uma mulher solicita um teste de paternidade para seu filho recém-nascido. As amostras disponíveis são swab bucal da mãe, da criança e do suposto pai.
2. Diagnóstico de infecção: um paciente adulto apresenta febre persistente, tosse e dispneia. O médico solicita a análise do swab nasofaríngeo do paciente para a detecção molecular de um patógeno respiratório.
Você faz parte da equipe do laboratório e será responsável por executar os procedimentos indicados para cada demanda, bem como analisar e interpretar os resultados, garantindo confiabilidade, sensibilidade e aplicabilidade prática.
MATERIAL COMPLEMENTAR (Disponível em Material da Disciplina e na Sala do Café)
CAMPOS, Cristian Kely Pereira et al. Exames de paternidade pelo DNA: uma metodologia para ensino da genética molecular. Genética na Escola, v. 5, n. 2, p. 7–13, 2010.
Disponível em: https://geneticanaescola.com.br/revista/article/download/102/92/94.
DESENVOLVENDO O TRABALHO
Com base nesse contexto e conforme os conteúdos estudados no livro da disciplina e no material complementar, RESPONDA:
1. EXPLIQUE por que a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é considerada uma técnica essencial para análises forenses e diagnósticas, especialmente quando a quantidade de DNA disponível é limitada.
2. DESCREVA como a PCR é aplicada nos testes de paternidade baseados em repetições consecutivas curtas ou microssatélites (STR, do inglês, Short Tandem Repeats).
3. JUSTIFIQUE a escolha da PCR para a detecção do patógeno respiratório e INDIQUE qual tipo de PCR deve ser utilizado quando o patógeno possui RNA como material genético.
4. CITE duas vantagens e duas limitações da técnica de PCR.
5. EXPLIQUE a importância das variações de temperaturas e dos números de ciclos da PCR.
6. Após a amplificação do DNA por PCR convencional, INDIQUE duas técnicas que podem ser utilizadas para a análise dos produtos amplificados.
7. Sobre a análise e interpretação dos resultados, RESPONDA:
7.1. Com base no padrão de bandas observado no gel de eletroforese abaixo, JUSTIFIQUE se o resultado é compatível ou não com a paternidade.
Figura 1. Eletroforese de DNA em gel de agarose dos produtos de PCR no teste de paternidade.
Marker: marcador de peso molecular (DNA ladder) com bandas de referência em bp (pares de bases). Fonte: a autora.
7.2 Analise o padrão de bandas presentes no gel de eletroforese a seguir e EXPLIQUE se houve ou não detecção do patógeno na amostra analisada.
Figura 2. Eletroforese de DNA em gel de agarose dos produtos de PCR na detecção do patógeno respiratório.
Marker: peso molecular (DNA ladder) com bandas de referência em bp (pares de bases). Fonte: a autora.
8. INSIRA as referências, nas normas da ABNT, que foram utilizadas para elaborar o seu MAPA.
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